T4 DNA Ligase
貨号/規格：E1014-A/200 Weiss U; E1014-B/1,000 Weiss U; E1014-C/5,000 Weiss U
濃度：5 Weiss U/µL
産品簡介
T4 DNA Ligase催化雙鏈 DNA 或 RNA 中并列的(de) 5'-磷酸和(hé / huò) 3'-羟基末端之(zhī)間形成磷酸二酯鍵。該酶可修複雙鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交體中的(de)單鏈缺口，将 DNA 片段與粘性末端或平末端連接結合，但對單鏈核酸無活性。
T4 DNA 連接酶需要(yào / yāo) ATP 作爲(wéi / wèi)輔因子(zǐ)。
産品組成
| 組分 | E1014-A | E1014-B | E1014-C |
| T4 DNA Ligase (5 Weiss U/µL) | 40 µL | 200 µL | 200 µL × 5 |
| 10X T4 DNA Ligase Buffer | 0.5 mL | 1.5 mL | 1.5 mL × 5 |
| 50% PEG | 0.3 mL | 1.5 mL | 1.5 mL × 5 |
儲存條件
保存于(yú)-20°C。
來(lái)源
重組 E. coli 菌株，含有從噬菌體 T4 克隆的(de)基因 30。
單位定義
1個(gè) Weiss 單位是(shì)指在(zài) 37°C 下 20 分鍾内催化 1 nmol 的(de) [32PPi] 轉化爲(wéi / wèi)可吸附形式所需的(de)酶量。在(zài)以(yǐ)下混合物中測定酶活性：
66 mM Tris-HCl （pH 7.6）、6.6 mM MgCl 2、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [32PPi]。1個(gè) Weiss 單位相當于(yú)大(dà)約 200 個(gè)粘性末端連接單位（CEU）。1個(gè)CEU是(shì)指在(zài)特定條件下（即在(zài)16°C下30分鍾内），将λ（lambda）DNA的(de)HindIII片段連接達到(dào)50%所需的(de)酶量。
适用範圍
• 克隆限制性内切酶生成的(de) DNA 片段
• 克隆 PCR 産物
• 将雙鏈寡核苷酸連接子(zǐ)或接頭與 DNA 相連
• 定點突變
• 擴增片段長度多态性 (AFLP)
• 連接酶介導的(de) RNA 檢測
• 雙螺旋 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交體中的(de)缺口修複
• 線性 DNA 的(de)自環化