PowerScript RT SuperMix
貨号/規格:R1081/100 rxns, R1082/500 rxns, R1083/2500 rxns
産品說(shuō)明
PowerScript RT SuperMix是(shì)一(yī / yì /yí)種優化的(de)5X逆轉錄混合物,包含兩步法RT- qPCR工作流程中第一(yī / yì /yí)鏈cDNA合成所需的(de)所有成分。它含有耐熱性逆轉錄酶,支持在(zài)高溫下的(de)cDNA合成。同時(shí)含有鼠源RNase抑制劑保護模闆RNA不(bù)被降解。混合物中包含的(de)随機六聚體和(hé / huò)Oligo dT引物,可以(yǐ)充分進行各類RNA的(de)逆轉錄。本品可對低至單拷貝的(de)RNA進行逆轉錄,産生的(de)cDNA産物是(shì)qPCR檢測的(de)理想模闆,保證檢測的(de)靈敏和(hé / huò)準确。
産品組分
組分 |
R1081(100 rxns) |
R1082(500 rxns) |
R1083(2500 rxns) |
PowerScript RT SuperMix |
400 μL |
400 μL×5 |
10 mL |
保存條件
-20℃保存,有效期2年。
适用範圍
第一(yī / yì /yí)鏈cDNA 合成
注意事項
l 成功的(de)cDNA合成來(lái)自高質量的(de)RNA。高質量的(de)RNA至少應保證全長的(de)完整性并且不(bù)含逆轉錄酶的(de)抑制劑,如EDTA或 SDS。
l 檢測所需的(de)RNA量取決于(yú)感興趣轉錄物的(de)豐度。一(yī / yì /yí)般情況下,建議總RNA爲(wéi / wèi)1 ng ~ 1 μg或mRNA 0.1 ng ~ 100 μg。
l 在(zài)操作過程中,注意防止引入RNase導緻RNA降解。RNA最好保存于(yú)-70℃,避免反複凍融。
l 基因組DNA或過量産品的(de)存在(zài)會幹擾目标RNA的(de)準确定量,特别是(shì)對于(yú)低拷貝目标。無RT對照反應可以(yǐ)通過将PowerScript RT SuperMix在(zài)95℃下熱失活1分鍾再添加模闆RNA來(lái)模拟無逆轉錄反應;此外,應設置NTC(無模闆對照)反應,以(yǐ)證明逆轉錄反應是(shì)有意義的(de)。
l cDNA産物應置于(yú)-20℃或以(yǐ)下保存,避免反複凍融。